IC50值为35.075μg/mL. JFL3007a、BWL6045是表现出对HepG-2细胞

作者:admin 来源:未知 点击数: 发布时间:2019年10月12日

  本文以我国珍稀药用植物海南粗榧为研究材料,对分别采自海南省热带植物园、海南省尖峰岭国家自然保护区、海南省霸王岭国家自然保护区的海南粗榧树皮、树枝、树叶和树根样品,进行了内生真菌的分离,并纯化保藏,对其发酵产物进行了抗肿瘤活性筛选,以期望找到可以产三尖杉酯碱类或其他抗肿瘤活性物质的内生真菌,为开发新的药物资源提供依据。 经过分离纯化,并根据菌落形态分类,挑选出247株海南粗榧内生真菌,其中海南省热带植物园36株,尖峰岭自然保护区68株,霸王岭自然保护区143株。采用MTT法对其发酵液抗肿瘤活性进行了分析。共发现32株菌株对人慢性粒白血病细胞K562具有抑制活性,占测试菌株总数的12.96%。选择其中具有较高抑制活性且形态差异显著的9个菌株,测试其乙酸乙酯提取物对K562、NB4、HL-60、HepG-2和LoVo细胞的抑制活性,进行抗肿瘤活性复筛。结果显示,9株菌株发酵液的乙酸乙酯提取物对K562、NB4、HL-60和HepG-2细胞呈现出不同程度的抑制活性:9株内生线种以上的指示肿瘤细胞株有细胞毒活性。其中,BWL6127对K562细胞的抑制活性最强,IC50值为3.582μg/mL; ZWY1021对NB4细胞的抑制活性最强,IC50值为29.750μg/mL; JFL3007a对HL-60细胞的抑制活性最强,IC50值为35.075μg/mL. JFL3007a、BWL6045是表现出对HepG-2细胞有活性的仅有的两株菌株。9株菌中,JFL3007a对4种肿瘤细胞的IC50值都在40μg/mL以下。所有菌株乙酸乙酯提取物在实验浓度条件下,均未对LoVo细胞显示出抑制活性。 采用HPLC-MS的方法对菌株JFL3007a和BWL6045的发酵代谢产物进行初步分析。菌株JFL3007a含有22种主要化合物,其中,2’-乙酰白芷素、异苦鬼臼酮可能为其主要的抗肿瘤活性物质;菌株BWL6045含有23种主要化合物,其中,8-p-乙氧基白术内酯Ⅲ、O-甲基唐松草檗碱可能为其主要的抗肿瘤活性物质。 对菌株JFL3007a和BWL6045的菌落及显微形态特征的分析显示,两者均为半知菌亚门,腔孢纲,球壳孢目中的拟茎点霉属(Phomopsis),为第一次在海南粗榧植物中分离得到。

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